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| 目的利用改进的CRISPR/Cas9-2hitKO技术构建核因子E2相关因子1(NFE2L1)缺失的肺癌A549细胞,并观察NFE2L1敲除对肺癌A549细胞增殖的影响。方法利用改进的CRISPR/Cas9-2hitKO基因编辑技术,将重组NFE2L1-gRNA表达载体转入肺癌A549细胞,嘌呤霉素筛选NFE2L1缺失的肺癌A549细胞,并通过DNA测序和Western Blot实验验证获得的A549细胞。采用CCK8和克隆形成实验观察敲除NFE2L1对肺癌A549细胞增殖的影响。结果DNA测序和Western Blot实验结果表明,成功获得稳定敲除NFE2L1的肺癌A549细胞。CCK8和克隆形成实验均表明敲除NFE2L1促进肺癌A549细胞的增殖。结论利用CRISPR/Cas9-2hitKO技术成功构建NFE2L1缺失的A549细胞,敲除NFE2L1能够促进肺癌细胞增殖。 |
| 关键词: NFE2L1 CRISPR/Cas9 肺癌A549细胞 |
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| 基金项目:四川省科技计划项目(编号:2017JY0130)； 南充市校科技战略合作专项项目(编号:NSMC20170407)； 四川省大学生创新创业训练计划项目(编号:201710634018)； |
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