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miR-30a-5p靶向JAK1调控人胃腺癌AGS细胞自噬的机制研究
刘海英;曹天柱;崔自重;1
长沙市第三医院介入血管科,普通外科二十四病室,血液肿瘤科
摘要:
目的 探究miR-30a-5p靶向JAK1调控人胃腺癌AGS细胞自噬的机制。方法 体外培养人正常胃黏膜上皮细胞(GES-1)和胃腺癌细胞(AGS)。RT-qPCR检测miR-30a-5p表达水平,Starbase数据库预测miR-30a-5p的表达水平及其与JAK1的潜在结合位点,双荧光素酶报告实验验证miR-30a-5p对JAK1基因的靶向调控作用,免疫荧光检测自噬标志物LC3阳性细胞水平,WB检测JAK1和自噬相关蛋白(Beclin-1、LC3 II/I和p62)的表达水平。结果 与GES-1组相比,AGS组细胞中miR-30a-5p表达水平显著降低;过表达miR-30a-5p后,AGS细胞中自噬相关蛋白(Beclin-1、LC3 II/I)表达水平以及自噬标志物LC3阳性细胞水平显著降低,p62蛋白的表达水平显著升高;miR-30a-5p与JAK1存在结合位点且靶向负调控JAK1;与miR-30a-5p过表达+oe-NC对照处理,miR-30a-5p过表达同时过表达JAK1处理后观察到AGS细胞中自噬相关蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ的蛋白表达水平明显增加,p62蛋白水平明显降低,进一步的免疫荧光也观察到miR-30a-5p过表达+过表达JAK1后LC3荧光强度明显增加。结论 miR-30a-5p靶向负调控JAK1蛋白的表达,抑制人胃腺癌AGS细胞自噬。
关键词:  胃腺癌  miR-30a-5p  JAK1  AGS细胞  细胞自噬  
DOI:
分类号:
基金项目:长沙市自然科学基金(编号:kq2202014);
Abstract:
Key words:  
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