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目的 探究沉默三结构域蛋白 27( TRIM27) 对人黑色素瘤 C8161 细胞活性、迁移、侵袭及上皮间质转化
(EMT)的影响以及核因子 κB(NF-κB)信号通路的调控作用。 方法 体外培养 C8161 细胞,将 C8161 细胞分为对照组
(Con,不做干预)、阴性对照组(si-NC,转染 si-NC 至 C8161 细胞)和沉默 TRIM27 组( si-TRIM27,转染 si-TRIM27 至 C8161
细胞),用实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)法检测鉴定各组细胞 TRIM27 表达水平。 沉默 TRIM27 组细胞进一步分为 siTRIM27 组、si-TRIM27 + Y 组(加入 5 μmol / L NF-κB 通路抑制剂 BAY11-7082)和 si-TRIM27 + A 组(加入 1 μmol / L NF-κB
通路激活剂 Prostratin),干预 24 h。 细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活力,Transwell 小室法检测 5 组细胞迁移和侵袭
能力;Western Blotting 法对 EMT 和 NF-κB 通路关键蛋白的表达进行测定。 结果 si-TRIM27 组的 TRIM27 表达水平显著
低于 si-NC 组(P < 0. 05),证明 si-TRIM27 转染成功。 与 si-NC 组相比,si-TRIM27 组细胞活力、迁移、侵袭、N-cadherin、Vimentin、磷酸化(p)-NF-κB 蛋白水平下降,E-cadherin 蛋白水平升高,差异均有统计学意义(P < 0. 05);与 si-TRIM27 组相
比,si-TRIM27 + Y 组中 BAY11-7082 增强了 si-TRIM27 对 C8161 细胞的上述作用(P < 0. 05),si-TRIM27 + A 组中 Prostratin
则削弱了 si-TRIM27 对 C8161 细胞的上述作用(P < 0. 05)。 结论 沉默 TRIM27 可能通过下调 NF-κB 通路来抑制人黑色
素瘤 C8161 细胞活力、迁移、侵袭及 EMT 进程。 |
关键词: 黑色素瘤 三结构域蛋白 27 核因子 κB 信号通路 细胞活力 迁移 侵袭 上皮间质转化 |
DOI:10.16252/j.cnki.issn1004-0501-2025.02.007 |
分类号:R739.5 |
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