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沉默TRIM27对人黑色素瘤细胞C8161迁移、侵袭及上皮间质转化的抑制作用研究
王敬茶;刘雪;邱思思1
河北中石油中心医院皮肤科,河北 廊坊 065000
摘要:
目的 探究沉默三结构域蛋白 27( TRIM27) 对人黑色素瘤 C8161 细胞活性、迁移、侵袭及上皮间质转化 (EMT)的影响以及核因子 κB(NF-κB)信号通路的调控作用。 方法 体外培养 C8161 细胞,将 C8161 细胞分为对照组 (Con,不做干预)、阴性对照组(si-NC,转染 si-NC 至 C8161 细胞)和沉默 TRIM27 组( si-TRIM27,转染 si-TRIM27 至 C8161 细胞),用实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)法检测鉴定各组细胞 TRIM27 表达水平。 沉默 TRIM27 组细胞进一步分为 siTRIM27 组、si-TRIM27 + Y 组(加入 5 μmol / L NF-κB 通路抑制剂 BAY11-7082)和 si-TRIM27 + A 组(加入 1 μmol / L NF-κB 通路激活剂 Prostratin),干预 24 h。 细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活力,Transwell 小室法检测 5 组细胞迁移和侵袭 能力;Western Blotting 法对 EMT 和 NF-κB 通路关键蛋白的表达进行测定。 结果 si-TRIM27 组的 TRIM27 表达水平显著 低于 si-NC 组(P < 0. 05),证明 si-TRIM27 转染成功。 与 si-NC 组相比,si-TRIM27 组细胞活力、迁移、侵袭、N-cadherin、Vimentin、磷酸化(p)-NF-κB 蛋白水平下降,E-cadherin 蛋白水平升高,差异均有统计学意义(P < 0. 05);与 si-TRIM27 组相 比,si-TRIM27 + Y 组中 BAY11-7082 增强了 si-TRIM27 对 C8161 细胞的上述作用(P < 0. 05),si-TRIM27 + A 组中 Prostratin 则削弱了 si-TRIM27 对 C8161 细胞的上述作用(P < 0. 05)。 结论 沉默 TRIM27 可能通过下调 NF-κB 通路来抑制人黑色 素瘤 C8161 细胞活力、迁移、侵袭及 EMT 进程。
关键词:  黑色素瘤  三结构域蛋白 27  核因子 κB 信号通路  细胞活力  迁移  侵袭  上皮间质转化
DOI:10.16252/j.cnki.issn1004-0501-2025.02.007
分类号:R739.5
基金项目:
Abstract:
Key words:  
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