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| 目的 探讨长链非编码RNA LHFPL3-AS1通过miR-205-5p/HMGB1调控人瘢痕疙瘩成纤维细胞（HKF）功能的研究。方法采用RT-PCR检测瘢痕疙瘩组织、正常皮肤组织、人皮肤成纤维细胞（HSF）和HKF中LHFPL3-AS1、miR-205-5p和HMGB1 mRNA的表达水平。将HKF分为control组、sh-NC组、sh-LHFPL3-AS1组、sh-LHFPL3-AS1+inhibitor NC组、sh-LHFPL3-AS1+miR-205-5p inhibitor组、sh-LHFPL3-AS1+oe-NC组、sh-LHFPL3-AS1+oe-HMGB1组;RT-PCR检测各组细胞中LHFPL3-AS1、miR-205-5p和HMGB1 mRNA表达水平;CCK-8法检测细胞增殖;细胞划痕实验检测细胞迁移;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测细胞中α-SMA、Col-Ⅰ和Col-Ⅲ、cleaved caspase-3、PCNA、MMP-9、HMGB1蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-205-5p与LHFPL3-AS1和HMGB1的靶向关系。结果 与正常皮肤组织比较,瘢痕疙瘩组织中LHFPL3-AS1和HMGB1 mRNA表达水平升高,miR-205-5p表达水平降低（P<0.05）。与HSF比较,HKF中LHFPL3-AS1和HMGB1 mRNA表达水平升高,miR-205-5p表达水平降低（P<0.05）。与control组和sh-NC组比较,sh-LHFPL3-AS1组HKF中LHFPL3-AS1和HMGB1 mRNA表达水平、OD450（24 h、48 h）值、划痕愈合率、α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、PCNA、MMP-9和HMGB1蛋白表达水平降低,miR-205-5p表达、凋亡率、cleaved caspase-3蛋白表达水平升高（P<0.05）;下调miR-205-5p表达或过表达HMGB1均可降低沉默LHFPL3-AS1表达对HKF的抑制作用（P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验证实,miR-205-5p可直接靶向结合LHFPL3-AS1和HMGB1。结论 沉默LHFPL3-AS1可通过上调miR-205-5p进而抑制HMGB1表达,抑制HKF的增殖、迁移及胶原合成,并促进其凋亡。 |
| 关键词: LHFPL3-AS1 miR-205-5p/HMGB1 人瘢痕疙瘩成纤维细胞 α-SMA Col-Ⅰ |
| DOI：10.16252/j.cnki.issn1004-0501-2026.03.001 |
| 分类号:R739.5 |
| 基金项目:武汉市卫生健康委员会医学科学研究项目(编号:WX23A07)； |
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