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| 目的 探讨长链非编码RNA SOX2重叠转录本（LncRNA SOX2-OT）靶向微小RNA-186-5p（miR-186-5p）/锌指E盒结合同源框1（ZEB1）轴对黑色素瘤（MM）细胞的影响。方法 体外常规培养正常人皮肤黑色素细胞系PIG1以及人MM细胞系A375、M14和A2058,检测各细胞LncRNA SOX2-OT、miR-186-5p、ZEB1 mRNA表达水平。将A2058细胞分为对照组、si-NC组、si-SOX2-OT组、si-SOX2-OT+inhibitor-NC组、si-SOX2-OT+miR-186-5p inhibitor组。检测LncRNA SOX2-OT、miR-186-5p、ZEB1 mRNA表达水平（RT-qPCR法）;细胞活力（CCK-8试剂盒法）、增殖活性（克隆形成实验）、迁移（划痕试验）、侵袭能力（Transwell小室法）;ZEB1、E-cadherin、TGF-β1、α-SMA蛋白表达量（Western blot法）。验证miR-186-5p与LncRNA SOX2-OT、ZEB1之间的靶向关系。结果与对照组、si-NC组比较,si-SOX2-OT组LncRNA SOX2-OT、ZEB1 mRNA表达水平、OD450值、细胞克隆数、划痕愈合率、细胞侵袭数以及ZEB1、TGF-β1和α-SMA蛋白表达量降低,miR-186-5p表达水平以及E-cadherin蛋白表达量升高（P<0.05）;与si-SOX2-OT+inhibitor-NC组比较,siSOX2-OT+miR-186-5p inhibitor组ZEB1 mRNA水平、OD450值、细胞克隆数、划痕愈合率、细胞侵袭数以及ZEB1、TGF-β1和α-SMA蛋白表达量升高,miR-186-5p表达水平及E-cadherin蛋白表达量降低（P<0.05）。转染miR-186-5p mimic后,LncRNA SOX2-OT-WT、ZEB1-WT的荧光素酶活性降低（P<0.05）。裸鼠移植瘤实验显示,敲低SOX2-OT可提高移植瘤miR-186-5p和E-cadherin蛋白表达,降低ZEB1蛋白表达、抑制移植瘤的生长;抑制miR-186-5p的表达可减轻敲低SOX2-OT对移植瘤生长的抑制作用（P<0.05）。结论 在MM细胞中LncRNA SOX2-OT异常高表达,敲低LncRNA SOX2-OT可靶向上调miR-186-5p的表达,抑制ZEB1的表达,进而抑制MM细胞的恶性生物学行为。 |
| 关键词: 长链非编码RNA SOX2重叠转录本 微小RNA-186-5p/锌指E盒结合同源框1轴 黑色素瘤细胞 恶性生物学行为 |
| DOI：10.16252/j.cnki.issn1004-0501-2026.03.006 |
| 分类号:R739.5 |
| 基金项目:河北省卫生健康委员会项目资助(编号:20251413)； |
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