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目的探讨竹节香附素A(Raddeanin A,RA)靶向miR-21-5p/smad7对肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响。方法将不同质量浓度(0、0.5、1、2、4、8μM)的RA与A549细胞共同培养。采用CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验验证miR-21-5p与smad7之间的靶向关系; qRT-PCR检测miR-21-5p、smad7 mRNA表达; WB检测smad7蛋白表达。结果与未处理组相比,RA浓度为4、8μM时细胞增殖明显降低(P<0.05或P<0.01);RA浓度为1、2、4、8μM时细胞凋亡则明显升高(P<0.01); miR-21-5p mRNA表达在RA浓度为0.5、1、2、4、8μM时明显低于未处理组(P<0.01); smad7 mRNA表达在RA浓度为0.5、1、2、4、8μM时明显高于未处理组(P<0.05或P<0.01);双荧光素酶报告实验证实smad7是miR-21-5p的下游靶向调控分子;转染miR-21-5p mimics后smad7 mRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.01)。结论竹节香附素A对肺腺癌A549细胞增殖有明显抑制作用,其机制可能与靶向miR-21-5p/smad7调控有关。 |
关键词: 肺腺癌 竹节香附素A A549细胞 miR-21-5p |
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