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目的 探究罗哌卡因对人肝癌细胞黏附、迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响及对磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的调控作用。方法 体外培养人肝癌MHCC97H细胞,分为对照组(不做干预),实验组(200、400、600和800 μmol/L罗哌卡因)和抑制剂组(200 μmol/L罗哌卡因+30 μmol/L PI3K/Akt通路抑制剂LY294002),干预24 h。用细胞计数试剂盒(CCK-8)法测定细胞活力,采用细胞黏附实验测定黏附细胞数,用Transwell小室测定细胞的迁移和侵袭能力,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白免疫印迹(WB)法对细胞EMT和PI3K/Akt通路相关因子表达水平进行分析。结果 与对照组比较,800μmol/L罗哌卡因的细胞活力降低(P<0.05);200、400和600μmol/L罗哌卡因的细胞黏附数、迁移数、侵袭数以及p-PI3K、p-Akt、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和纤连蛋白(FN)表达量减少(P<0.05),E-钙黏蛋白(E-cadherin)mRNA和蛋白表达量增加(P<0.05);与200μmol/L罗哌卡因组相比,抑制剂组上述指标变化更为显著(P<0.05)。结论 罗哌卡因可能是通过抑制PI3K/Akt信号通路来抑制人肝癌MHCC97H细胞的黏附、迁移、侵袭和EMT进程。 |
关键词: 罗哌卡因 肝癌 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号通路 黏附 迁移 侵袭 上皮间质转化 |
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